【cck8细胞增殖实验报告】一、实验目的

本实验旨在通过CCK-8法检测不同浓度药物对细胞增殖能力的影响，评估药物对细胞的毒性作用及潜在的生物活性。CCK-8试剂是一种基于WST-8的新型细胞活性检测试剂，具有灵敏度高、操作简便、重复性好等优点，广泛应用于细胞毒性和增殖实验中。

二、实验材料与方法

1. 实验材料

- 细胞株：HepG2（人肝癌细胞）

- 培养基：RPMI 1640培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）

- CCK-8试剂（由日本同仁化学研究所提供）

- 96孔板

- 酶标仪（用于测定450 nm波长下的吸光度）

- 无菌操作设备（超净工作台、移液枪等）

2. 实验步骤

- 将HepG2细胞以适当密度接种于96孔板中，每孔体积为100 μL，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养24小时。

- 各组分别加入不同浓度的药物溶液（0 μM、10 μM、20 μM、40 μM、80 μM），每个浓度设置3个复孔。

- 继续培养24小时后，向每孔中加入10 μL CCK-8试剂，混匀后在培养箱中继续孵育2小时。

- 使用酶标仪在450 nm波长下测定各孔的吸光度值（OD值）。

- 根据OD值计算细胞存活率，并绘制剂量-效应曲线。

三、实验结果

实验结果显示，随着药物浓度的增加，细胞存活率逐渐下降，呈现出明显的剂量依赖性。其中，在80 μM浓度下，细胞存活率仅为对照组的约30%，表明该药物对HepG2细胞具有较强的抑制作用。

| 药物浓度（μM） | 平均OD值 | 相对存活率（%） |

|----------------|-----------|------------------|

| 0| 1.25| 100|

| 10 | 1.12| 89.6 |

| 20 | 0.98| 78.4 |

| 40 | 0.76| 60.8 |

| 80 | 0.37| 29.6 |

四、讨论

本实验采用CCK-8法对药物的细胞毒性进行了初步评估，结果显示药物对HepG2细胞具有显著的抑制作用。该方法具有较高的灵敏度和可重复性，能够有效反映药物对细胞增殖的影响。然而，由于实验仅使用了一种细胞系，未来可进一步扩大实验范围，研究药物在多种细胞中的作用效果，以更全面地评估其生物学特性。

五、结论

综上所述，CCK-8实验是一种简便、高效且可靠的细胞活性检测方法，适用于药物筛选及细胞毒性研究。本实验验证了药物对HepG2细胞的抑制作用，为进一步的药理学研究提供了基础数据支持。